Предимплантационная генетическая диагностика

                                                               ПГТ общее описание

Морфология (внешний вид) эмбриона -  не лучший инструмент для принятия решения о переносе. Даже самые прекрасные эмбрионы могут быть генетически аномальными. Такие эмбрионы или не прикрепляются в матке или останавливаются в развитии ещё в первом триместре (неразвивающиеся беременности).

Предимплантационное генетическое тестирование (ПГТ) предназначено для выявления у эмбрионов отклонений в генетическом материале до переноса в матку,т.е. до того, как женщина забеременеет. Проведение ПГТ увеличивает шансы  наступления беременности и рождения здорового ребенка у конкретной семейной пары. Предимплантационное генетическое тестирование применяется уже в течение двадцати лет, и методы исследования продолжают совершенствоваться. В нашем центре при проведении ПГТ врачи используют современные молекулярно-генетические методы (QF-ПЦР, сравнительную геномную гибридизацию на чипах (arrCGH) и секвенирование нового поколенияNGS).

                                  

                                                        ПГТ-А методом arrCGH 24

 Краткое описание

ПГТ-А(предимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий) направлено на выявление возможных числовых и структурных хромосомных аномалий у эмбриона.Проведение ПГТ-А увеличивает успешность ЭКО до 70%.

Предимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий проводится методом сравнительной геномной гибридизациина чипах(arrCGH), что позволяет с высокой достоверностью и специфичностью определить хромосомные аномалии в биоптате трофэктодермы эмбриона.

Подробнее об услуге

Описание:

Сравнительная геномная гибридизация на чипах (arrCGH) – это микроматричнаятехнология, позволяющая оценить структуру всего генома (числовые аномалии, структурные перестройки-микроделеции, микродупликации, несбалансированные транслокации). Данный метод основан на сравнении двух образцов генетического материала: исследуемого и контрольного, с использованием микроматриц (ДНК-чип), на которые нанесены последовательности олигонуклеотидов (контроль). Это исследование включает следующие этапы:

• Мечение выделенного и контрольного образца различными по цвету флуорохромами (специальными красителями- метками: зеленым и красным).
• Смешивание образцов в соотношении 1:1, при этом геномы разных эмбрионов исследуются отдельно.
• Разрушение(денатурация) двухцепочечной молекулы ДНК для получения массы одноцепочечных молекул.
• Фиксация образцов на ДНК-микрочипах. На одну хромосому приходится от 60 тыс. точек, что позволяетобнаруживать незначительные отклонения в количестве генетического материала. Вносимые меченые геномные образцы гибридизируются (комплементарно связываются) с молекулами чипа.
• Промывка микрочипа по специальной технологи для удаления оставшихся не гибридизированными молекул и фиксации связанных ДНК-нитей.
• Сканирование микроматрицы, позволяющее провести анализ количества и расположения флуоресцирующих (светящихся) ДНК-молекул. Для этого используются специальный прибор, которые провоцируют свечение внесенных меток. В результате исследования создается хромосомная карта, на основании которой специалисты выдают заключение.

Заключение содержит информацию о каждом эмбрионе, о наличии или отсутствии у него анеуплоидий. Полученная информация помогает супружеской паре и лечащему врачу-репродуктологус помощью врача-генетика определиться с выбором эмбриона, который будет перенесен в полость матки.

      Исследование ПГТ-А методом arrCGHпозволяет

• выявить 100% численных нарушений хромосом (анеуплоидии)
• выявить мозаичные формы анеуплоидий
• установить структурные аномалии –наличие дополнительных или отсутствующие участков хромосом (дупликации и делеции)

     Ограничение метода

• не дает возможность дифференцировать сбалансированный хромосомный набор от нормального в случаях сбалансированных хромосомных перестроек (транслокации, инверсии, инсерции)
• не позволяет установить процент клеток с мозаичной формой анеуплоидии
• в ряде случаев не позволяет выявлять триплоидный хромосомный набор;
• не позволяет выявлять однородительские дисомии.

• Преимущество исследования ПГТ-А методом arrCGH

• точность метода составляет 99,99%
• Исследование проводится в течение 7 рабочих дней.
• Исследование позволяет наиболее точно оценить качество и количество хромосом эмбриона, по сравнению с цитогенетическими методами.
• Проводится детальная оценка всего генома, в отличии от FISH-диагностики и метода QF-PCR.
•  По результатам исследования Вы можете получить бесплатную консультацию врача-генетика.

• Показания:

• Вступление в протокол ЭКО женщины старшего репродуктивного возраста (старше 35 лет).
• Наличие у женщины в анамнезе привычного невынашивания беременности на разных сроках гестации.
• Повторные или многократные неудачные попытки ЭКО при подсадке эмбрионов хорошего и даже отличного качества. Нарушения имплантации и прекращение эмбриогенеза в основном обусловлены хромосомными аномалиями.
• Формы бесплодия, связанные с патологией половых хромосом (мужское бесплодие)
• Любая семейная пара, планирующая ВРТ, которая хочет повысить результативность протокола ЭКО

• Для определения показаний, схемы и методов ПГТ в конкретной семье, необходима предварительная консультация врача-генетика и тесное сотрудничество лаборатории генетической диагностики с клиникой ЭКО.

  Подготовка к исследованию

  Для проведения исследования ПГТ-А 24не требуется специальная подготовка со стороны пациента.

  На 5-й день эмбрионального развития начинается стадия бластоцисты. На этом этапе происходит дифференциация клеток эмбриона. До этого момента все клетки одинаковые, с одинаковыми возможностями. Во время дифференцировки проходит разделение на клетки:

• амниотического пузыря и плаценты, трофэктодерму (вспомогательные эмбриональные структуры),
• с другой стороны, другие клетки образуют внутреннюю клеточную массу (сам эмбрион).

• В этот момент проводится забор материала для проведения исследования ПГТ - берут те клетки, которые не принимают участия в развитии плода, и поэтому их биопсия не наносит вреда эмбриону. Проведение биопсии эмбриона на ранних стадиях развития, например, на 3-й день, как это делали раньше, показывает негативное воздействие на способность имплантации эмбриона. Напротив, биопсия на 5-й день гораздо безопаснее.Поэтому грамотно проведенная биопсия не оказывает негативного влияния на потенциал имплантации исследуемых эмбрионов. Из полученных клеток выделяются геномные образцы, которые и будут анализироваться в ходе предимплантационного генетического тестирования.

•                             

•                                                          ПГТ-А методом NGS24

  Краткое описание

  ПГТ-А(предимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий) направлено на выявление возможных числовых и структурных хромосомных аномалий у эмбриона. Самым современным методом исследования на сегодняшний день является методсеквенирования нового поколения (NGS).

  Подробнее об услуге

  Описание

  Cеквенирование нового поколения (NGS).В настоящее время является самым точным из существующих методов при проведении ПГТ. Секвенирование – это определение последовательности нуклеотидов (структурных единиц наследственного материала) в молекуле ДНК.

  Фактически в результате NGS составляют описание первичной структуры молекулы ДНК. А сравнение полученного результата с нормативными данными позволяет выявлять участки с различными отклонениями. Благодаря применению секвенирования следующего поколения каждая последовательность генетического кода расшифровывается несколько сотен раз.

  Основным достоинством технологии NGS является чрезвычайно высокая чувствительность и точность.

  Заключение содержит информацию о каждом эмбрионе, о наличие или отсутствие у него анеуплоидий. Полученная информация помогает супружеской паре и лечащему врачу репродуктологу с помощью врача-генетика определиться с выбором эмбриона, который будет перенесен в полость матки

  Исследование ПГТ-А методом NGSпозволяет

• выявить 100% нарушений числа хромосом (анеуплоидии);
• выявить мозаичные формы анеуплоидий и установить процент мозаицизма;
• обнаружить дефекты на хромосомном уровне с большей детализацией.

• Ограничение метода

• не дает возможность дифференцировать сбалансированный хромосомный набор от нормального в случаях сбалансированных хромосомных перестроек;
• не позволяет выявить мозаицизм с уровнем меньше 20%;

• Преимущество исследования ПГТ-А методом NGS

• Возможность исследования всех 24 вида хромосом одновременно с точностью –99,999%
• Метод NGS в настоящее время является самым современным и наиболее точным методом предимплантационного генетического тестирования
• Исследование проводится в течение 14 рабочих дней.
• Высокая чувствительность и точность NGS дает возможность исключить мелкие хромосомные нарушения в случае носительства родителями структурных перестроек.
•  По результатам исследования Вы можете получить бесплатную консультацию врача-генетика.

• Показания

• Возраст женщины более 35 лет;
• Повторные и множественные неудачные попытки ЭКО при переносе эмбрионов с правильной морфологией;
• Привычное невынашивание беременности в анамнезе;
• Формы бесплодия, связанные с патологией половых хромосом (мужское бесплодие)
• Носительство сбалансированных хромосомных перестроек у супругов для исключения несбалансированных аномалий хромосом, в том числе микроделеций и микродупликаций.
• Любая семейная пара, планирующая ВРТ, которая хочет повысить результативность протокола ЭКО

• Подготовка к исследованию

  Для проведения исследования ПГТ-А 24 не требуется специальная подготовка со стороны пациента.

  На 5-й день эмбрионального развития начинается стадия бластоцисты. На этом этапе происходит дифференциация клеток эмбриона. До этого момента все клетки одинаковые, с одинаковыми возможностями. Во время дифференцировки проходит разделение на клетки:

• амниотического пузыря и плаценты, трофэктодерму (вспомогательные эмбриональные структуры),
• с другой стороны, другие клетки образуют внутреннюю клеточную массу (сам эмбрион).

• В этот момент проводится забор материала для проведения исследования ПГТ - берут те клетки, которые не принимают участия в развитии плода, и поэтому их биопсия не наносит вреда на эмбрион. Проводить биопсию эмбриона на ранних стадиях развития, например, на 3-й день, которую проводили раньше, показала негативное воздействие на способность имплантации эмбриона. Напротив, биопсия на 5-й день гораздо безопаснее.Поэтому грамотно проведенная биопсия не оказывает негативного влияния на потенциал имплантации исследуемых эмбрионов. Из полученных клеток выделяются геномные образцы, которые и будут анализироваться в ходе предимплантационного генетического тестирования.

  Предимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий (24 хромосомы, arrCGH), 1 образец УСКОРЕННЫЙ

  Проведение ПГТ-А методом сравнительной геномной гибридизации (arrCGH).

  (С полным описанием метода можно ознакомиться в разделе «Преимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий (24 хромосомы, arrCGH), 1 образец».)

• Исследование проводится в течение 3 рабочих дней.
• Предимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий (24 хромосомы, arrCGH), 1 образец В СВЕЖЕМ ЦИКЛЕ

• Проведение ПГТ-А методом сравнительной геномной гибридизации (arrCGH).

  (с полным описанием метода можно ознакомиться в разделе «Преимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий (24 хромосомы, arrCGH), 1 образец».)

• Исследование проводится в течение 24 часов с момента поступления и материала в лабораторию.

                                      Полногеномная амплификация для проведения ПГТ-А

Полногеномная амплификация (WGA) является подготовительным этапам к проведению ПГТ.

При проведении биопсии эмбриона на стадии бластоцисты для исследования получают нескольких клеток (3-5) трофобласта. Таким образом, ПГТ ограничено малым количеством доступного для анализа генетического материала в клетках биоптата. Проведение полногеномной амплификации генетического материала позволяет значительно увеличить количество ДНК, необходимой для проведения преимплантационного генетического тестирования. Продукты полногеномной амплификации могут быть использованы для анализа различными методами, включая секвенированиенового поколенияпоколения (NGS) или сравнительную геномную гибридизацию на чипах (aCGH).

ДНК, полученная в результате полногеномной амплификации, может храниться при температуре

 -20 ºС длительное время без каких-либо отрицательных последствий для образца.

• Долгосрочное хранение ДНК при низких температурах позволяет отсрочить по времени проведение полного предимплантационного генетического тестирования для Ваших образцов.